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HPLC法測(cè)定保健品中合成色素的分析方法

文檔作者：梁偉郭菊玲李波張琦惠劉庚文檔來(lái)源：云南省玉溪市食品藥品檢驗(yàn)所		點(diǎn) 擊數(shù)：	更新時(shí)間： 2025年06月08日
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Oct 2015 CHINA FOOD SAFETY 111
分析與檢測(cè)
合成色素主要是指人工化學(xué)合成
方法所制得的有機(jī)色素，主要是以煤
焦油為原料中分離出來(lái)的苯胺染料為
原料制成的，對(duì)人體有害，危害包括
一般毒性、致瀉性、致突變、及致癌
作用。在很長(zhǎng)的一段時(shí)間里，由于人
們沒(méi)有認(rèn)識(shí)到合成色素的危害，并且
合成色素與天然色素相比較，具有色
澤鮮艷、著色力強(qiáng)、性質(zhì)穩(wěn)定和價(jià)格
便宜等優(yōu)點(diǎn)，許多國(guó)家在食品加工行
業(yè)普遍使用合成色素。目前我國(guó)批準(zhǔn)
使用的合成色素有6 個(gè)品種，即莧菜紅、
胭脂紅、檸檬黃、日落黃、靛藍(lán)和亮藍(lán)。
事實(shí)上，在巨大的經(jīng)濟(jì)利益的驅(qū)使下，
我國(guó)食品中合成色素的超標(biāo)、超范圍
使用現(xiàn)象屢見(jiàn)不止。
儀器與試藥
Alient 12600 高效液相色譜儀，
配有DAD 檢測(cè)器、自動(dòng)進(jìn)樣器和安捷
倫1260 工作站；Alient Cary-40 紫外
分光光度計(jì)，AEL-200 型電子天平，超
聲儀。檸檬黃(GBW(E)100158 北京海岸
鴻蒙1 mg/ml）、日落黃(GBW(E)100159
北京海岸鴻蒙1 mg/ml）、莧菜紅
(GBW(E)100160 北京海岸鴻蒙1 mg/
ml）、胭脂紅(GBW(E)100161 北京海
岸鴻蒙1 mg/ml）、新紅(SB05-219-
2008 農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所100
ug/ml)、赤蘚紅(GBW(E)100163 北京海
岸鴻蒙1 mg/ml）、亮藍(lán)(GBW(E)100162
北京海岸鴻蒙1 mg/ml）、靛藍(lán)
(10716-201111 98.3% 中國(guó)食品藥品
檢定研究院）。甲醇色譜純，超純水，
乙酸銨分析純。
色譜條件
采用Z O R B A X S B - C 1 8
（4.6mm×250mm 5μm），流動(dòng)相：甲
醇—乙酸銨溶液（PH=4,0.02 mol/L），
柱溫：30℃，柱流速:1.00 ml/min，進(jìn)
樣量為10μl（見(jiàn)表1）。
溶液的制備
對(duì)照品溶液。分別精密量取上述對(duì)
照品溶液檸檬黃0.10 ml、日落黃0.10
ml、莧菜紅0.10 ml、胭脂紅0.10 ml、
新紅2.50 ml、赤蘚紅0.10 ml、亮藍(lán)0.10
ml、靛藍(lán)0.10 ml，同置5 ml 容量瓶中，
加PH 值6 的水稀釋至刻度，搖勻。
供試品溶液的制備。采用液—液
分配法進(jìn)行提取，濃縮，定容。
方法學(xué)考察
專(zhuān)屬性考察 取各對(duì)照品單標(biāo)溶液，
用紫外分光光度計(jì)在800nm-200nm 波
長(zhǎng)范圍進(jìn)行掃描，記錄圖譜結(jié)果：檸檬
黃的最大吸收波長(zhǎng)為:430 nm、日落黃
的最大吸收波長(zhǎng)為:480 nm、莧菜紅的
最大吸收波長(zhǎng)為：520 nm 及215 nm、
胭脂紅的最大吸收波長(zhǎng)為：505 nm 及
215 nm 、新紅的最大吸收波長(zhǎng)為：505
nm 及235 nm 、赤蘚紅的最大吸收波長(zhǎng)
為：525 nm、亮藍(lán)的最大吸收波長(zhǎng)為：
630 nm、靛藍(lán)的最大吸收波長(zhǎng)為：675
nm 及295 nm。為了區(qū)分各合成色素的
紫外吸收波長(zhǎng)，使其便于分開(kāi)，選擇檸
檬黃檢測(cè)波長(zhǎng)430 nm、日落黃檢測(cè)波
長(zhǎng)480 nm、莧菜紅檢測(cè)波長(zhǎng)520 nm、
胭脂紅檢測(cè)波長(zhǎng)505 nm、新紅檢測(cè)波
長(zhǎng)505 nm、赤蘚紅檢測(cè)波長(zhǎng)525 nm、
亮藍(lán)檢測(cè)波長(zhǎng)630 nm、靛藍(lán)檢測(cè)波長(zhǎng)
675 nm。
精密度考察 儀器重復(fù)性 采用上
述不同波長(zhǎng)多通道檢測(cè)，連續(xù)重復(fù)進(jìn)
樣5 針，記錄色譜圖。濃度為20μg/
ml， 檸檬黃峰面積為：874.90588、
874.36664、874.27808、873.77386、
873.82758,RSD 為0.1%，日落黃峰面積
為583.32092、582.85150、583.20679、
582.54541、582.67517，RSD 為
0.1%、莧菜紅峰面積為515.29663、
514.94006、515.38654、515.02313、
514.94751，RSD 為0.1%， 胭脂紅
峰面積為495.16882、495.15695、
495.31964、494.88983、494.94214，
RSD 為0.1%， 赤蘚紅峰面積為
974.24695、974.27136、974.69141、
973.86969、973.83759，RSD 為
0.1%， 亮藍(lán)峰面積為1366.12866、
1362.6394、1365.46802、1365.13684、
1367.81079，RSD 為0.1%，靛藍(lán)峰面積
為107.31249、107.59335、107.2607、
107.79092、107.6981，RSD 為0.3%，
濃度50μg/ml， 新紅對(duì)照品溶液峰
面積為1520.22107、1519.95789、
1520.35364、1518.823、1520.13965，
RSD 為0.2%。考察儀器的精密度，表明
儀器精密度良好。
討論
本文對(duì)GB/T5009.35-2003《食品中
合成著色劑的測(cè)定》采用高效液相色
譜法單波長(zhǎng)（254 nm）測(cè)定法檢測(cè)進(jìn)
行比較，故采用梯度洗脫、多波長(zhǎng)同
時(shí)檢測(cè)8 種合成著色劑，排除單波長(zhǎng)
檢測(cè)時(shí)合成色素的相互干擾，快速、
簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確率高、能更好滿(mǎn)足于食品
中合成著色劑的分析檢測(cè)，具有較高
的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。
作者簡(jiǎn)介：梁偉（1981.1）男，云南，
江川，大學(xué)本科，主管藥師。研究方向：
食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)。
HPLC 法測(cè)定保健品中合成色素的分析方法
□梁　偉　郭菊玲　李　波　張琦惠　劉　庚　云南省玉溪市食品藥品檢驗(yàn)所
表1　梯度洗脫程序
時(shí) 間(min) 甲 醇（%） 乙酸銨溶液（%）
0 ～ 5.00 20 → 35 80 → 65
5.00 ～ 12.00 35 → 98 65 → 2
12.00 ～ 18.00 98 → 2 2 → 98
18.00 ～ 19.00 98 → 2 2 → 98
19.00 ～ 25.00 20 → 80 80 → 20

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